HIJOS NO DESEADOS, ACCIDENTALES O ADULTERINOS; AIRE; ALGO QUE NADIE PUEDE DETENER, PERO SÍ PUEDE PREVENIRSE; NO SE GUÍEN SÓLO POR LAS PRUEBAS DE SANGRE PARA PROBAR PATERNIDAD; A MIS GORDITOS Y FLAQUITOS; CUIDADO CON EL AZÚCAR।
HIJOS NO DESEADOS, ACCIDENTALES O ADULTERINOSFebrero 19 de 2012, 9:27 P.M. Buenas y santas noches. A las parejas que por desquite, soberbia, pasión, borrachera, ociosidad, alucinógenos, una noche loca, ambición, vanidad o cualquier otro motivo diferente al verdadero amor de pareja, queden embarazados; no están obligados a convivir juntos o a casarse por ese embarazo.
Se responde por la preñez, pasándole a la madre lo necesario para ella y su bebé, sin obligarla a convivir con un hombre que limite su libertad y a quien no ame de verdad y sólo lo tenga para que le dé de comer o lo que necesita para su diario vivir. Ni se obliga al joven padre o viejo(hasta los mayores se equivocan por soberbia, pasión o desquite) a casarse o convivir con una mujer que sólo finge amarlo por interés o comodidad, por evitarse las burlas de los demás o por evitar el qué dirán.
Cuando no hay amor verdadero, deben separarse, cuidar de su bebé como buenos amigos e hijos de Dios, sin obligarse, engañarse, ni hacerse daño uno al otro. Si el hijo es producto de adulterio por traición a novio-a, prometido-a o esposo-a; la relación debe terminar entre los dos y cuidar de su bebé sin volver a caer en tentación.
Los adúlteros deben dejar de adulterar, rompiendo esa relación maldita y buscando el verdadero amor en otra persona, libre de bajas pasiones y de la influencia de Satanás, sólo así pueden recuperar sus almas, su paz interior y la comunión con el Creador y su creación.
Ninguna relación amorosa, basada en el adulterio, debe proseguir. Está maldita desde su origen, porque no estaba escrita en el libro de la Vida por Yahveh Jesús, por eso deben dejar de pecar y dañas sus destinos, dados por Dios, separándose y buscando su verdadera pareja y su verdadero destino.
La mayoría de los hijos adulterinos, pagan el pecado de sus padres y muchos mueren a temprana edad. Los hijos no deseados, deben tenerse, darles amor, si a pesar del tratamiento psicológico, la madre o el padre no lo aceptan o lo quieren, cédanlo a una pareja que lo cuide y lo ame de verdad y con esmero. Sea cual sea el motivo de nacer un hijo accidental o no deseado, no lo maten, no le digan que lo concibieron accidentalmente sin amor, cuídenlo, no lo vuelvan malcriado y enséñenlo a ser un buen hijo de Dios y hermano de todos.
AIREFluido gaseoso que forma la atmósfera de la tierra. Su potencia depende de la gravedad que ejerza la luna sobre las aguas, al iniciar su vaivén en mayor o en menor grado, incide en la velocidad del aire convirtiéndolo en viento. De igual manera el sol y los demás seres y astros que rodean o están en el planeta Tierra, ayudan a dicha transformación de oreo a viento.
En el universo infinito se encuentra en gran número de planetas habitables. Son como bolsas que están dentro y alrededor de los seres y astros del universo. También tienen un ciclo circular, de cuyo recorrido, puede ocurrir: que lleguen viciados o renovados a su origen. Que regrese como aire suave, dando sólo oreo, o como viento fuerte ocasionando huracanes, tornados o tormentas que destruyan lo que encuentren a su paso. Esto quiere decir que como todo lo que existe en el universo, puede tener o ser de incidencia benigna o maligna, sobre los seres, elementos y astros que encuentre a su paso.
En el plano espiritual existe una energía perversa o negativa, generada por miles de millones de seres que existen. Esa energía puede ocasionarse por acción o accidentalmente por omisión. Es importante que sepa, que el orín o suciedad que genera la maldad en el plano espiritual, hace que el aire en algunas zonas se desestabilice y dé muestras de gran furia de este elemento, originando cataclismos lamentables, por las pérdidas irrecuperables de seres que deja a su paso.
CÁMARAS DE AIRETodos los sistemas del cuerpo humano están dotados de unas pequeñísimas cámaras de aire, que pueden ser naturales o síntoma de enfermedad, peligro o desgaste del ser humano. Las más pequeñas sólo podrían ser observadas con un lente macro, que pudiera hacer visibles las nanocámaras de aire al ojo humano. Estando nosotros dentro del cuerpo material del Ente infinito, encontraremos muchas similitudes.
SISTEMA CIRCULATORIO: tiene cámaras de aire, minerales, elementos, compuestos, orín, líquidos y sólidos que excreta el sistema endocrino.
CUERPO UNIVERSAL: tiene cámaras de aire dentro de todos sus componentes: agua de lluvia, ríos, lagos y mares. Minerales líquidos. Elementos químicos líquidos. Orín dejado por oxidaciones de minerales y elementos químicos. Grumos de grasas y los residuos de micción y excretas que van a ser eliminados, enviados al sistema endocrino para su selección y eliminación.
SISTEMA RESPIRATORIO: tiene bolsas de aire, introducción y espiración de aire y todo el sistema funciona en torno al aire.
CUERPO UNIVERSAL: hay bolsas de aire dentro y fuera de los astros y seres del universo. Dentro de los líquidos, minerales, elementos y compuestos. Forma parte principal del ecosistema del universo infinito.
Las cámaras de aire más riesgosas, son las dejadas por la ambición del hombre, al extraer los minerales o elementos. Es importante tener cuidado con las extracciones de petróleo crudo y gas, entre otros minerales que tiene la tierra en depósitos subterráneos. Se debe procurar rellenar los lugares donde se han realizado extracciones de minerales, con residuos sólidos y líquidos que en miles de años, den origen a nuevas fuentes del mismo mineral. Evitando dejar cámaras de aire o vacío, donde existía el mineral; se evita desplazamiento traumático de la tierra con el movimiento traumático de su capa tectónica.
Cuando se realicen extracciones, procuren que la zona urbana, esté bien retirada y que las viviendas en los países extractores, sean construidas en loza flotante o antisísmica.
El planeta Tierra, tiene gran cantidad de bolsas de aire en su interior, al extraer los líquidos quedan vacíos. Con el transcurrir del tiempo, el peso de la masa térrea que está encima, por la fuerza de atracción del centro de la tierra, hace ceder la capa o parte tectónica poco a poco y de allí se generan seísmos y terremotos, cuyo reflejo si son de gran intensidad, ocasionan los tsunamis, generando catástrofes y pérdida de miles de vidas.
ESTO ES LO QUE SE CONOCE DE LOS TSUNAMIS¿Qué es un Tsunami?
Un tsunami (se pronuncia tsuu-NA-mii) es una serie de olas, que se generan en un océano u otros cuerpos de agua, a causa de terremoto deslizamientos de tierra, erupción volcánica o impacto de meteoritos. Los tsunamis generan grandes daños cuando chocan contra las costas. Algunas personas llaman a los tsunamis, "olas de mareas", pero estas olas monstruosamente gigantes realmente tienen muy poco que ver con las mareas, de manera que el término de "olas de marea" en realidad es incorrecto.
Las olas de un Tsunami son diferentes a las que llegan hasta las orillas de los mares o lagos. Este tipo de olas son generadas por los vientos que hay mar adentro, y son olas bastante pequeñas en comparación con las olas de un tsunami. Las olas de un tsunami en el océano abierto pueden tener más de 100 kilómetros de largo. ¡Eso es lo que medirían 1 000 canchas de fútbol americano!. Las olas son inmensas, y viajan muy de prisa, a una velocidad aproximada de 700 km/hr., pero tienen sólo un metro de altura cuando están mar adentro.
A medida que un tsunami viaja en dirección a las aguas menos profundas de la costa, desacelera y aumenta en altura. Aún cuando es muy difícil ver a un tsunami en el mar, cuando llega a la costa puede crecer hasta alcanzar muchos metros de altura y, a medida que se acerca de la costa, desarrollar mucha energía. Cuando finalmente llega a la costa, podría parecer que el tsunami es una marea que crece o decrece rápidamente, o una serie de olas con una altura máxima de hasta 30 metros.
Pocos minutos antes de que un tsunami choque contra la costa, el agua que se encuentra cerca de la costa se retirará y podrá verse el fondo marino. Por lo general, la primera ola no es la más grande, y cada 10 a 60 minutos llegarán más olas. Estas olas se mueven mucho más rápidamente de lo que puede correr una persona. El peligro de un tsunami puede durar muchas horas después de la primera ola. Diferente a otro tipo de olas, las olas de un tsunami no se giran ni rompen.
Las costas afectadas por un tsunami se erosionarán severamente. Un tsunami puede causar inundaciones hasta cientos de metros tierra adentro. El agua se mueve con tal fuerza que es capaz de destrozar casas y otro tipo de edificaciones.
Lo que usted no sabe, es: todo lo que es y existe, recibe energía y vida, de la fuente principal situada en el plano espiritual. Una energía negativa concentrada, atrae energía negativa de los elementos, satélites y astros que rodean al planeta. Cuando se conjuga la energía negativa de una parte de la tierra, con la energía negativa extra terráquea, con la fuerza de gravedad de la luna, la de la tierra y los demás astros que la rodean, se puede sufrir un desplome interno o sobre la tierra, ocasionando graves daños.
La mejor manera de limpiar el campo espiritual, es no generar sentimientos ni actos negativos para no dañar el equilibrio del ecosistema en la Tierra.
Recuerde que está vivo el planeta, tiene un ciclo de vida como todos los seres y astros del universo: nace, crece, se reproduce y muere. La muerte del planeta, ocurrirá dentro de miles de millones o dentro de pocos años, por implosión o explosión. Son los hombres quienes están llamados a cuidarlo para no desestabilizar los elementos de la naturaleza, de tal manera que lo dañen gravemente y para siempre.
Si duda de mis aseveraciones, investigue las épocas y los lugares, donde se han presentado los tsunamis y observará que el 90% de los casos, se han presentado en lugares donde el materialismo, los vicios y la degradación del ser humano es más evidente, sofisticada y se da con mayor evidencia de violaciones y de crueldad, tanto con los seres humanos, como con el ecosistema y los demás seres del planeta y en pocas ocasiones, son generados por el desplazamiento de los continentes.
Pangea, es el nombre de la masa continental, donde se encontraban unidos el continente americano con África y Europa. Lo que se conoce de Pangea:
Pangea es el nombre que recibe el supercontinente que dio origen a los continentes actuales. En concreto se creé que existió durante las eras mesozoica y paleozoica, hace unos 300 millones de años.
También llamado la Pangea, su nombre procede de Alfred Wegener, autor de la famosa teoría de la deriva continental. Supuestamente la forma original de la masa formaba una C, dejando un océano en su interior, llamado Océano Paleo-Tetis, que podría tratarse el día de hoy del mar Negro. El supercontinente estaba rodeado en su totalidad por otro océano, denominado Pantalasa.
La Tierra, cuya edad data de unos 4.600 millones de años, ha visto ya durante su historia bastantes supercontinentes, y Pangea tan sólo fue el último de ellos, pero el hecho de que sea el último del que se tiene constancia hace que sean bastantes los datos que disponemos de él. Por ejemplo, las regiones interiores, entre las que se encontraba lo que hoy es la Antártida, eran extremadamente secas ya que las precipitaciones rara vez llegaban ahí, debido a la gran distancia existente con el mar.
La desintegración de Pangea se produjo hace 200 millones de años aproximadamente, fracturándose en dos continentes, Laurasia al norte y Gondwana al sur, siendo atravesado por el mar de Tetis, que el día de hoy es el mar Mediterráneo. Estos dos continentes también se fueron fragmentando progresivamente debido al movimiento de las placas tectónicas, hasta adquirir la formación que conocemos hoy en día.
A través de los siglos, se ha visto cómo la distancia entre estos continentes, es cada vez mas grande. Esto significa que al separarse más y más por ese lado, por el lado occidental, del continente americano, se está presentando todo lo contrario con Chica, Coreas y Japón, cada vez, se está acercando más y más la masa continental y en unas décadas o milenios, se fusionará totalmente en una nueva Pangea.
Por eso es tan importante que los seres humanos estén prevenidos y procuren mejorar la situación de la población a todo lo largo del estos continentes, con el fin de evitar el cataclismo que se avecina, con los terremotos, maremotos y tsunamis, que desde hace algún tiempo esporádicamente han ocurrido, como el que generó el daño nuclear en Japón y que con el tiempo van a crecer en intensidad, poco a poco, hasta el colapso final, que significa el encuentro de estos continentes y su fusión por un tiempo, para con la fuerza de rebote, las fuerzas de atracción, o de repulsión, la gravedad y energías que influyen en todo el planeta; volver a viajar poco a poco la masa continental, hacia el otro lado, buscando fusionarse como la Pangea original o primera.
RECOMENDACIONES: el fondo del océano, cambia constantemente por diversos factores, elementos y energías que inciden en esos cambios, aunados a los desperdicios y consecuencias del daño ecológico consuetudinario en todo el planeta.
Desde ahora, deben poner cuidado en la manera de edificar, hagan más viviendas antisísmicas. Cuiden de tener plantas nucleares y de elementos radiactivos lejos del mar, ríos, de la población y lugares vitales para la vida y nutrición de los seres del planeta.
Dispongan de los desechos y desperdicios tóxicos en lugares donde no ocasionen daño, se salgan o generen colapso con movimientos telúricos fuertes. Sepan que estos movimientos se van a seguir dando más fuertes y con mayor frecuencia, conforme la capa tectónica avanza y se encuentra con obstáculos, atolones y prominencias del suelo marino, que no le permiten pasar sin trauma para quienes habitamos encima de la tierra y también para la fauna marina.
Velad, no os durmáis, que esos movimientos pueden sacar a la tierra de su eje o de la elipse solar, dañarle su gravedad y estabilidad y puede quedar flotando como una pera loca. Cuando esto siga sucediendo(terremotos) con mayor frecuencia, verán cómo su dios dinero, de nada les va a servir.
Procuren prepararse y en lo posible mermar el cataclismo continuado en el planeta, que se está dando hacia las generaciones futuras con mayores cuidados de su ecología. De qué vale tanto poder, dinero y sabiduría, frente a estos y sucesos que no podemos prevenir ni evitar.
NO SE GUÍEN SÓLO POR LAS PRUEBAS DE SANGRE PARA PROBAR PATERNIDAD
Lo que se conoce sobre el ADN en pruebas de paternidad.
Resumen
La facilidad para obtener perfiles genéticos ha revolucionado la identificación humana para resolver casos criminales así como determinar relaciones biológicas de parentesco, comúnmente paternidad. Las repeticiones cortas en tándem, más bien conocido como STRs son los marcadores genéticos más utilizados con este fin. Un perfil de ADN se compone de los genotipos para varios STRs, que forman un código casi único para diferenciar o relacionar a una persona biológicamente. Actualmente el análisis de laboratorio se basa en tres técnicas: 1) extracción de ADN, 2) PCR multiplex, y 3) electroforesis capilar, y existen kits comerciales para desarrollar fácilmente esta tarea. En paternidad se espera que entre el perfil de ADN de un supuesto padre (SP) e hijo (H) exista al menos una concordancia por cada marcador. Cuando para más de un marcador no hay concordancia entre SP y H, se establece una exclusión y prácticamente el resultado es incuestionable. Sin embargo, cuando todo concuerda entre SP y H se debe hacer una valoración bioestadística del caso, estimando la probabilidad de que algún otro individuo tomado al azar de la población pudiera concordar con el hijo. Para esto se debe haber estudiado a los marcadores STRs en la población donde se realizan las pruebas de ADN, para usar las frecuencias alélicas de los STRs en el análisis bioestadístico. A dicha estimación se le denomina índice de paternidad (IP), que indica cuantas veces es más probable haber encontrado la concordancia SP-H considerando que sí es el padre, respecto a que fuera un individuo tomado al azar de la población. Este IP puede ser transformado a porcentaje de paternidad (W), para facilitar la interpretación. Por ejemplo, un IP de 1000 se convierte en W= 99.9%. Existen formulas especificas para calcular el IP, las cuales cambian según el genotipo de cada marcador analizado, y según el caso de paternidad, ya sea que participe o no la madre, si no está el padre pero sí están los abuelos, si se duda de la paternidad de ambos padres, etc. En México existen estos estudios que sustentan su correcta aplicación, suele ser más preocupante que no hay suficiente personal capacitado, tanto en el ámbito laboratorial como en la impartición de justicia, que garanticen siempre la correcta interpretación de la prueba sobre bases científicas.
IntroducciónEn 1985 Alec Jeffreys implementó el uso del material genético (ADN[2]) para identificación humana, obteniendo un patrón de bandas parecido a un código de barras al que denominó huella digital del ADN (DNA fingerprinting) (Figura 1). Actualmente a esta prueba se le conoce como perfil de ADN, huella genética, o simplemente prueba de ADN. Este perfil de ADN se ha demostrado que es prácticamente único e irrepetible, a excepción de los gemelos monocigotos[3], lo que permite diferenciar a cualquier persona de otra y establecer sus relaciones biológicas de parentesco. Las aplicaciones de la prueba de ADN son diversas, pero destacan dos, las pruebas de paternidad y los análisis forenses; este último en casos criminales para establecer la relación de un sospechoso con la evidencia dejada en la escena de un crimen (p. ejem. mancha de sangre o semen), para incriminarlo o, en su caso, exonerarlo. Otras aplicaciones menos comunes son para establecer relaciones familiares de restos cadavéricos en casos de desastres o personas desaparecidas, en investigaciones históricas (p. ejem. restos de la familia Romanov, origen de Cristobal Colón, etc.), o en antropología al analizar poblaciones humanas para estudiar su origen y evolución. Esta revisión sobre la prueba de ADN se centrará en su aplicación en paternidad, revisando para ello aspectos básicos del genoma humano y de los marcadores moleculares, técnicas para obtener un perfil de ADN, aspectos bioestadísticos para la interpretación del resultado emitido por un laboratorio, y preguntas frecuentes sobre la prueba de ADN.
Figura 1.
Alec Jeffreys, quién ideo el uso del ADN para identificación humana en Leicester, UK. Al fondo se observa la huella genética del ADN (DNA fingerprinting) como Jeffreys llamo al patrón de bandas que obtuvo, parecido a un código de barras, presumiblemente único para cada individuo.
Genoma Humano
La estructura del ácido desoxirribonucleico o ADN es bien conocida: una doble cadena que gira sobre sí que contiene información hereditaria codificada solo por cuatro “letras” o nucleótidos[4]: A, G, C y T (adenina, guanina, citosina y timina, respectivamente) (Figura 2). El ADN es importante porque su información es necesaria para el funcionamiento de la célula, ya que contiene las “instrucciones” para sintetizar proteínas[5], quienes propiamente llevan a cabo las diferentes funciones celulares, en forma de enzimas, hormonas, receptores, transportadores, moléculas estructurales, de contracción, soporte, inmunológicas, etc.
Figura 2.
Estructura de doble hélice (izquierda) del ADN o ácido desoxirribonucleico. Los nucleótidos (A, G, C, y T) se encuentran en el interior de la doble cadena de ADN.
A la dotación completa de material genético que recibimos de nuestros padres se le denomina genoma[6], y se localiza en el núcleo de prácticamente todas nuestras células, por lo que teóricamente es posible realizar la prueba de ADN a partir una sola célula de casi cualquier tejido. Los humanos recibimos una dotación genética doble, vía paterna y materna, que constituye nuestro genoma, y que contiene 6,000 millones de nucleótidos. De toda la información que constituye el genoma, solo una pequeña parte sirve o se “expresa” para formar proteínas (menos del 5%); a los fragmentos del genoma con una secuencia de nucleótidos que sirve para formar una proteína se les denomina genes[7] (Figura 3).
Figura 3.
Localización del genoma humano en el núcleo de la célula. Se muestra un cromosoma y un gen, este último caracterizado por tener información para sintetizar una proteína
Marcadores Moleculares
Considerando la gran cantidad de información que contiene el genoma, podemos visualizar su potencial para identificación humana. En particular la prueba de ADN se realiza analizando secuencias del genoma muy variables, es decir, que entre los individuos de una población puede tener diferentes formas alternas denominadas alelos . Estas secuencias permiten diferenciar a un individuo de otro y, al heredarse de padres a hijos, también permite establecer relaciones biológicas de parentesco, por lo que se les conoce como marcadores genéticos o marcadores moleculares (por estar en la molécula del ADN). Cabe señalar que para cada marcador una persona tendrá dos alelos, uno materno y otro paterno, y a dicha combinación de alelos que recibimos de nuestros padres se le denomina genotipo . Específicamente las secuencias o marcadores empleados para realizar una prueba de ADN se caracterizan por tener repeticiones cortas en tándem , y son ampliamente conocidos por sus siglas en inglés como STRs (short tandem repeats) o microsatélites. A lo largo del genoma se encuentran miles de STRs que pueden ser usados como marcadores moleculares. Como su nombre lo dice, los STRs se componen de secuencias cortas repetidas, por ejemplo GATA, formando diversos alelos que se nombran por el número de veces que se encuentre la secuencia repetida; por ejemplo, el alelo 6 presentará seis veces la secuencia (p. ejem. GATA,GATA,GATA,GATA,GATA,GATA), y en una población podrían existir los alelos 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, etc. El par de alelos o genotipo de una persona para cada marcador STR (p. ejem. 6/9), permite diferenciarlo o relacionarlo con otras personas (Figura 4). Cuando la persona presenta dos alelos diferentes (uno materno y otro paterno), se dice que su genotipo es heterocigoto ; mientras cuando tiene un solo alelo se asume que recibió el mismo alelo de ambos padres, y se dice que su genotipo es homocigoto para el STR en cuestión. En una pareja de heterocigotos para alelos diferentes se pueden generar cuatro genotipos distintos en sus hijos, lo que permite diferenciar individuos estrechamente relacionados como los hermanos (Figura 4). Un perfil de ADN , que también suele llamarse huella genética, se genera obteniendo los genotipos de varios STRs, formando un código que presumiblemente puede llegar a ser único e irrepetible (6/9, 12/16, 17/21, 22/23, etc.). Hay que señalar que la nomenclatura (rango de alelos) de cada STR puede ser diferente, por ejemplo, para el marcador X los alelos pueden ir del 9 al 12, mientras para el marcador Y la nomenclatura va del 12 al 33, etc.
Figura 4.
Uso de los marcadores STRs para identificación humana. Los genotipos permiten establecer las relaciones de parentesco y diferenciar a un individuo de otro. De una pareja de heterocigotos se generan multiples genotipos en sus hijos.
Técnica para obtener el Perfil de ADN
La forma de obtener un perfil de ADN se basa en generar millones de copias o amplificar las secuencias del genoma que permiten diferenciar individuos, en este caso los marcadores STRs. Esta técnica permite replicar al ADN in vitro, y se conoce ampliamente por sus siglas en inglés como PCR[15] (polymerase chain reaction). La PCR se realiza por ciclos de temperatura en los que básicamente suceden los siguientes tres pasos en cada ciclo: 1) desnaturalización, por calor se abren las cadenas de ADN, 2) alineamiento de secuencias cortas conocidas como primers[16], que delimitan las regiones que se van a replicar, y 3) extensión, formándose cadenas nuevas de ADN por acción de la Taq polimerasa[17], una enzima termoestable capaz de añadir nucleótidos a los extremos de los primers. En cada ciclo de PCR se duplica la secuencia de interés (STRs), por lo que en solo 25 ciclos teóricamente habrá millones de copias, a lo que se conoce como “amplificado”, lo que facilitará enormemente su análisis posterior (Figura 5). Para el análisis post-PCR hay que recordar que los alelos STRs se diferencian por el número de veces que se repite una secuencia, esto significa que el tamaño o longitud va a ser diferente de un alelo de otro (Figura 4). Para ver estas diferencias se emplea la electroforesis[18], técnica para separar moléculas en una superficie de soporte (gel) por acción de un campo eléctrico en base a la carga y tamaño de la molécula; las más pequeñas corren más rápido mientras las grandes se van retrasando (Figura 6).
Figura 5.
Amplificación exponencial de una secuencia de ADN por ciclos de temperatura por la técnica de PCR
Figura 6.
Amplificación de STRs y detección por electroforesis en geles verticales de poliacrilamida en un caso forense. Nótese que el perfil de ADN de la mancha de sangre en ropa del sospechoso es igual al de la víctima.
Para ello simultáneamente se someten a electroforesis muestras con fragmentos de tamaño conocido, también llamados marcadores de peso molecular o estándar de tamaño, y/o una mezcla de los diferentes alelos posibles para los STRs que se están analizando, y que se conoce como escalera alélica[19] o ladder; con lo que resulta relativamente sencillo definir los alelos/genotipos y posteriormente el perfil genético de una persona. La electroforesis en una prueba de ADN se realiza de dos formas: 1) por geles verticales de poliacrilamida, técnica que ha caído francamente en desuso, y 2) electroforesis capilar (EC)[20], cuyo proceso es más preciso y automatizado, por lo que constituye el método de elección en los laboratorios de genética forense en el mundo. Finalmente, para observar el ADN amplificado (STRs) y sometido a electroforesis es necesario teñirlo; existen métodos tradicionales como la tinción con nitrato de plata de los geles de poliacrilamida (Figura 6), o más sofisticados que involucran la detección de fluorescencia añadida durante la PCR y que se detecta en sistemas automatizados de electroforesis capilar.
La siguiente descripción se enfocará en el análisis de varios STRs simultáneamente (PCR múltiplex), seguido por electroforesis capilar (EC) para obtener un perfil de ADN, donde existen diferentes kits o sistemas genéticos[21] que permiten amplificar hasta 16 marcadores, 15 STRs y un marcador sexual llamado amelogenina[22] que define el sexo de la muestra. Los kits comerciales más empleados son AmpFlSTR® Identifiler™ kit (Applied Biosystems, Foster City, CA), y el PowerPlex 16 (Promega Corp., Madison, CA). En ambos casos, durante la PCR los productos amplificados (STRs) se marcan con diferentes fluorocromos[23], formándose así grupos de STRs que fueron marcados con el mismo color, pero evitando que alelos de STRs diferentes se sobrelapen en tamaño (Figura 7).
Figura 7.
Los dos principales kits comerciales para identidad humana que analizan 15 STRs y el marcador sexual amelogenina (A). Los nombres de los STRs están en recuadros de colores, y en la parte de abajo un estándar de tamaño o marcador de peso molecular para definir el tamaño de los alelos STRs. Nótese que cada STR abarca un rango de tamaño por los diferentes tamaños que sus alelos pueden tener, y que no se sobrelapa con otro STR.
Los amplificados deben someterse a electroforesis capilar, es decir, este proceso se hace a través de un tubo del tamaño de un capilar relleno de un polímero, donde bajo el mismo principio de separación por la carga y tamaño de la molécula, los amplificados se van separando al aplicar corriente eléctrica. Para este fin se usan analizadores genéticos, como el ABI-Prism 310 de Applied Biosystems, que de forma automatizada carga la muestra en el capilar para luego aplicar voltaje. De esta forma se separan los STRs hasta llegar a una ventana donde pasa un rayo laser que excita a los fluorocromos, que a su vez emiten fluorescencia detectada en una cámara CCD, la cual convierte esa luz en impulsos electrónicos que, con ayuda de un software, se representan gráficamente en un electroferograma[24] (Figura 8).
Figura 8.
Representación de los pasos que involucra el análisis de fragmentos de ADN por electroforesis capilar (EC).
Cabe señalar que la luz (longitud de onda) de las diferentes fluorescencias se sobrelapa, y la separación de colores se logra mediante el uso de valores que indican cuanto se sobrelapan cada uno de los colores, a lo que se denomina matriz. Durante el análisis del electroferograma para definir el perfil de ADN es muy importante que simultáneamente se corra en la EC una escalera alélica (ladder) con todos los alelos los STRs, lo que por comparación directa se facilita enormemente la asignación correcta de los alelos, genotipos, y finalmente perfil de ADN del individuo. Cabe señalar que todo este proceso dura alrededor de 30 minutos por muestra, facilitando enormemente esta labor. Una vez realizada la electroforesis capilar se observa el perfil de ADN de un individuo en un electroferograma, donde los picos de acuerdo a su color y posición nos indican los alelos (genotipo) que tiene la persona para cada STR. Si un individuo presenta uno o dos picos (alelos), indica que su genotipo es homocigoto o heterocigoto, respectivamente, para el STR en cuestión (Figura 9).
Figura 9.
Electroferograma del perfil genético de un individuo. El tamaño en nucleótidos (pb) y nombre del STR se muestra en la parte superior de cada carril. Debajo de cada pico se indican los alelos del individuo. Para amelogenina (A) se observa solo un pico y una X (mujer, XX).
Interpretación de resultados
Después de obtener los perfiles en una prueba de ADN para determinar la paternidad entre un supuesto padre y un hijo en disputa, existen dos resultados posibles al comparar sus perfiles: 1) Que para al menos dos marcadores no exista ninguna coincidencia entre los alelos/genotipos del supuesto padre e hijo, lo que se denomina exclusión[25], y se descarta de inmediato la paternidad biológica (Figura 10); 2) Que sí coincida el padre con el hijo en al menos un alelo en todos los marcadores analizados, lo que se puede interpretar como que el supuesto padre es el padre biológico del hijo en disputa. Pero cuidado, antes de llegar a esta conclusión se debe hacer una valoración bioestadística del caso que permita contestar la siguiente pregunta: ¿qué tan probable sería que el perfil de ADN de cualquier persona, que NO sea el padre biológico, hubiera coincidido por azar o casualidad con el perfil de ADN del hijo en disputa? (Figura 10). Para hacer esta valoración correctamente es necesario saber la frecuencia en la población de los alelos que concuerdan entre el supuesto padre e hijo. Para entender la importancia de estos datos poblacionales en la interpretación de una prueba de paternidad vamos a poner un ejemplo. Supongamos que en una prueba de paternidad el alelo concordante entre el supuesto padre e hijo lo tiene el 95% de las personas de la población mexicana, ¿esta sería una prueba contundente en el caso?, seguro que no, inclusive podemos inferir que esta es una evidencia muy pobre y que sería injusto concluir, considerando solo esta evidencia, que el supuesto padre es realmente el padre biológico, ya que la mayoría de varones que hubieran puesto en su lugar hubiera coincidido con el hijo. Por el contrario, si el alelo concordante entre el supuesto padre e hijo es muy raro y se observa solo en 1 de 10,000 personas de la población, intuitivamente inferimos que esta evidencia es valiosa para establecer la paternidad, ya que sería muy poco probable que hubiera concordado el hijo con el supuesto padre si éste último no lo fuera realmente.
Figura 10.
Diferencia en la interpretación de un análisis de paternidad donde concuerda el supuesto padre (SP) y el hijo (H), respecto a una exclusión de paternidad.
Las frecuencias poblacionales para hacer esta interpretación se obtienen de estudios en la población donde se realizan las pruebas de ADN y, preferentemente, deben estar publicados en revistas científicas serias (indizadas). En México ya se cuenta con varios estudios que permiten hacer esta valoración y la mayoría se citan al final de este trabajo. Se abordará la explicación sobre cómo interpretar una prueba de paternidad biológica con ADN a partir de un ejemplo donde la prueba indique paternidad, discutiendo posibles cuestiones que pudieran surgir al público no-experto.
Índice de Paternidad (IP) y Probabilidad de Paternidad (W)
Haciendo algunas simplificaciones diremos que la interpretación de un caso de paternidad consiste en contrastar dos hipótesis o posibilidades contrarias:
X: el supuesto padre (SP) es el padre biológico del hijo
Y: el supuesto padre (SP) NO es el padre biológico y por lo tanto es otro hombre
A este contraste se le conoce como índice de paternidad (IP), que indica cuantas veces es más probable que el SP sea el padre (X), respecto a que no lo sea (Y), y suele describirse como: IP = X/Y.
El IP se estima a partir de los alelos/genotipos de cada STR usado en una prueba de paternidad; luego se obtiene un IP total multiplicando el IP de todos los STRs, es decir: IP total= IPSTR-1 x IPSTR-2 x IPSTR-3 …etc. Otra manera de interpretar el IP total es convirtiéndolo a probabilidad de paternidad, ampliamente conocido como W, usando la siguiente fórmula:
W = IP/ (1+ IP)
Ejemplo 1 (trío)
Ahora vamos a emplear las fórmulas en casos reales a partir de diferentes combinaciones de genotipos. Comenzaremos con un caso de un trío donde participan padre, madre e hijo (Cuadro 1).
De la formula de IP= X/Y, normalmente X equivale en probabilidad a uno (1), ya que asume que el SP sí es el padre biológico; otra forma de describir esta probabilidad de haber encontrado esa concordancia pero en porcentaje es 100%. Mientras como Y asume que SP no es el padre, entonces se infiere que fue otra persona de la población y su probabilidad corresponde a la frecuencia poblacional del alelo concordante entre SP y H. Estas frecuencias se obtienen preferentemente de estudios genético-poblacionales del lugar donde se hizo la prueba, ya que las frecuencias pueden variar entre una población y otra. Otro detalle importante que se observa en las fórmulas para calcular el índice de paternidad (IP) del Cuadro 1, es que no todas son iguales, principalmente cambia la probabilidad de que sea un hombre al azar (Y), ya que la fórmula depende de la combinación de genotipos del trío, y particularmente involucra al alelo que concuerda entre SP y H. Por ejemplo, la lógica de la fórmula empleada en el los genotipos del trío para el primer STR (D21S11), es que el hijo es homocigoto 30 (30/30) por lo que hay dos posibilidades de que el hij@ haya recibido al alelo 30 de una hombre al azar de la población, ya sea de parte de la madre o del padre, de allí que resulte la fórmula igual a 1/frec (frecuencia del alelo concordante SP-H). Explicar los detalles de cada una de las formulas para los posibles genotipos de un trío se escapa de los objetivos de esta revisión, por lo cual se recomienda la lectura el libro de Evett y Weir (1998).
Ejemplo 2 (dúo)
Este caso es relativamente común y quién no participa normalmente es la madre. Se tomará la misma combinación de genotipos del ejemplo anterior eliminando a la madre, para notar los cambios en las fórmulas y el resultado final (Cuadro 2).
Comparando el cuadro l y 2 inmediatamente sobresalen dos aspectos: 1) Cambian algunas formulas, y por lo general disminuye la probabilidad de paternidad (W) y los índices de paternidad (IPs) estimados. Esta disminución se debe a la información que se pierde de la madre, por lo que no se puede estar seguro cuál de los alelos del hijo es el paterno y cuál es el materno (i. e. 10/11 para CSF1PO), mientras en el caso anterior se podía inferir fácilmente (11 para CSF1PO). Por lo anterior, al estimar que cualquier otro hombre de la población sea el padre biológico de H, se amplían las posibilidades. A pesar de esto, en general los sistemas genéticos comerciales que incluyen 15 STRs logran valores de W> 99.9%. Existen otras situaciones de paternidad más complejas donde cambia la interpretación matemática o bioestadística, como 1) establecer una paternidad cuando se duda de ambos padres, por ejemplo cuando se piensa que se les cambio al bebé en el hospital o se quiere emparentar restos cadavéricos con una pareja de supuestos padres, 2) cuando no está el padre y se quiere saber si dos individuos son hermanos, 3) cuando no está el padre pero se cuenta con los abuelo paternos, etc. La interpretación bioestadística en cada caso tiene que analizarse por separado para llegar a una conclusión científicamente correcta, e igual se recomienda a los interesados la lectura del libro del libro de Evett y Weir (1998).
¿Cuántos marcadores son necesarios para la prueba?Se ha sugerido por parte del FBI[26], entre otros organismos, el uso de 13 STRs para identificación genética humana que constituyen el CODIS[27] (Figura 11), los cuales son suficientes para resolver la mayoría de casos de paternidad. Sin embargo, en realidad el número de marcadores depende del caso, pudiendo ser menor o mayor a 13 marcadores; en realidad lo fundamental es llegar a una conclusión lo suficientemente confiable. ¿Cuándo es suficientemente confiable?, esta pregunta tiene una respuesta en realidad subjetiva que suele ser arbitraria. Hasta hace algunos años se empleaban algunos enunciados para interpretar el porcentaje de paternidad (W); entre los más famosos están los postulados de Hummel, donde W≥ 99,73% (equivalente a un IP de 400) se traducía como “paternidad prácticamente probada” y era límite máximo para valorar W. El desarrollo científico tecnológico hace que estos enunciados y valores a la fecha se consideren obsoletos e insuficientes. Actualmente entre los laboratorios hay dos tendencias: 1) reportar el valor de W e IP obtenido a partir del sistema genético ofertado; o 2) fijar un límite mínimo, por ejemplo de 1,000 o hasta 10,000 para el IP. En caso de no llegar al límite mínimo establecido se procedería a incrementar el número de marcadores, hasta alcanzar una exclusión clara o un valor aceptable de IP.
Figura 11.
Nombres de los 13 marcadores STRs que constituyen el Combined DNA Index System (CODIS), así como su posición en los cromosomas del genoma humano.
Exclusiones
En un caso estándar de un trío de SP-H-M analizado con 13 a 16 marcadores, es típico encontrar de 7 a 10 exclusiones, lo que no significa que podamos encontrar un caso con sólo 2 o 3 exclusiones, u otros con 12. En casos de paternidad con un solo progenitor el número de exclusiones típico es entre 4 y 5. En casos más complicados donde se pierde información genética se reduce el número de exclusiones que se espera encontrar, por lo que hay que aumentar el número de marcadores investigados. Existe un caso particular denominado exclusión de segundo orden[28], donde SP y H son homocigotos para alelos diferentes. Este resultado se puede explicar, además de la no-paternidad, porque comparten un alelo “invisible” (alelo nulo) y SP realmente es el padre biológico del hijo en disputa. Todos los demás casos de exclusiones se denominan de primer orden.
Oídos sordos a los IPs cuando se establece la exclusión
¿Qué se debe hacer cuando en una prueba con 13 marcadores, 3 excluyen o indican que “no es el padre” y los otros 10 concuerdan entre SP y H, lo que alguien podría interpretar como indicio de paternidad por ser la mayoría?, ¿A quién le hago caso?, ¿Cómo lo interpreto?. La respuesta es: Cuando se ha llegado a la conclusión de exclusión, por haber encontrado al menos dos exclusiones de primer orden, se hace oídos sordos hacia los demás marcadores. ¿Cómo se explica esto?. Sucede que los alelos detectados con marcadores en una prueba de ADN no son exclusivos de una familia, en realidad en una población mucha gente tiene los mismos alelos o genotipos sin que esto signifique que estén emparentados; es como tener ojos cafés, pelo negro o castaño en la población mexicana, mucha gente presenta estos rasgos sin que sean familiares cercanos. La fortaleza de la prueba es que se generan muchas combinaciones distintas entre los individuos de la población, aún entre hermanos, por lo que es muy poco probable que al tomar dos individuos al azar ellos tengan ya sea el mismo perfil de ADN (caso forense), o que un varón concuerde con un hijo en disputa, en al menos un alelo por cada STR de sus perfiles genéticos (caso de paternidad). Clásicamente con más de una exclusión de primer orden se consideraba una exclusión probada (definitivamente no es el padre), aunque cada vez se tiene más cuidado porque se han descrito casos de paternidad con hasta 3 cambios en el material genético (mutaciones) que ocasionan que no coincidan el SP y H[29], aunque el SP si sea padre biológico de H.
Como interpretar las mutaciones en paternidad
En un caso típico de mutación, una prueba de ADN con 13 o 15 marcadores indicaría que solo uno de ellos no concuerda entre SP y H, lo que hace pensar que la única exclusión observada en realidad se trata de una mutación. Una de las soluciones más sencillas se basa en la sugerida por la AABB[30], donde el IP del marcador que indica exclusión se obtiene con una formula sencilla IP= µ/PE. El símbolo mu (µ) indica la tasa de mutación que se ha estimado en general para los marcadores STRs (i. e. 7x10-3), y el poder de exclusión (PE)[31], parámetro de paternidad estimado y reportado junto con las frecuencias alélicas en los estudios poblacionales antes mencionados.
¿Paternidad sin el padre? Uso del cromosoma sexual Y
Cada vez que la célula se va a dividir el material genético se compacta en estructuras llamadas cromosomas[32]. La presencia del cromosoma Y en el esperma determina el sexo masculino en el futuro hijo en la mitad de las fertilizaciones, y establece una herencia exclusiva del cromosoma Y de padres a hijos varones (Figura 12). A diferencia de la mayor parte del material genético en el humano (23 cromosomas maternos y 23 paternos), los cromosomas Y no se “mezclan” durante la formación de los gametos en la meiosis[33]. Por esta razón, cada hombre recibe un cromosoma Y idéntico al de su padre. Cabe mencionar que existe una pequeña región en los extremos del cromosoma Y (aprox. 5%) que sí se “mezcla” con el otro cromosoma sexual (X). Dicha región en general es de poco interés con fines de identificación humana.
Figura 12.
Comparación de la herencia directa varón-varón del cromosoma Y (gris pequeño). Los demás cromosomas se “mezclan” cuando pasan de una generación a la siguiente. Por esta razón, los varones tenemos un cromosoma Y prácticamente igual al de nuestros padres y abuelos paternos.
Cuando se analizan varios marcadores del cromosoma Y, estos se heredan en bloque o en conjunto de padres a hijos varones, a lo que se le conoce como haplotipo[34]. También para el cromosoma Y los marcadores más utilizados en identificación humana son los STRs, ya que presentan un mayor número de alelos en la población, y a su vez una mayor capacidad de discriminar dos haplotipos y/o varones no-relacionados. Al analizar varios STRs del cromosoma Y (Y-STRs) en un varón se forma un código que constituye su perfil de ADN masculino. El análisis de laboratorio de los Y-STRs es el mismo que para los STRs no sexuales usados en las pruebas de paternidad “normales”, es decir PCR múltiplex y electroforesis capilar. Existen kits comerciales para este análisis, donde destacan los kits Powerplex 16 (Promega Corp.) y el Y-filer (Applied Biosystems) y donde se analizan 12 y 16 Y-STRs, respectivamente (Figura 13).
Figura 13.
Kit comercial para analizar 16 Y-STRs del cromosoma Y. Se muestran los colores (fluorocromos) con los que están marcados los diferentes Y-STRs. Se describe el rango de tamaño de los diferentes alelos de cada Y-STR en pares de bases (pb).
En casos criminales o análisis forense, el potencial del cromosoma Y recae en el hecho de que la mayoría de crímenes violentos son llevados a cabo por varones. Además, permite resolver casos en situaciones forenses particulares, como violaciones, donde existe una mezcla de ADN de hombre/mujer, ya que estos marcadores al ser específicos del varón generarán un perfil de ADN específico del agresor. Por su parte, en pruebas de paternidad, los Y-STRs tienen un gran poder de exclusión cuando el hijo en disputa es varón, y permiten resolver casos donde el supuesto padre no está disponible, ya que sus parientes varones por línea paterna (hermanos, tíos, abuelo, primos, etc.) sirven de referencia por tener el mismo haplotipo para el cromosoma Y (Figura 14).
Figura 14
Establecimiento de paternidad mediante Y-STRs en un caso donde el supuesto padre no está disponible. Se toma como referencia cualquier varón emparentado vía paterna. La exclusión es irrefutable, pero la concordancia debe confirmarse con STRs no sexuales.
Es importante considerar que los haplotipos del cromosoma Y son compartidos por todos los parientes vía paterna, que constituyen los llamados linajes paternos y que suelen agruparse dentro de las poblaciones de formas muy particulares de acuerdo a sus historias. Por consiguiente, es necesario considerar que en una prueba forense o de paternidad puede existir un número indeterminado de varones con el mismo haplotipo, además de los parientes por línea paterna del sujeto implicado. Por esta razón, aunque los haplotipos Y-STRs tienen un gran poder de exclusión y esta no necesita ser confirmada, en casos donde concuerda el SP-H o el sospechoso con la evidencia del crimen, es conveniente confirmar la relación biológica con STRs no-sexuales. La desventaja más importante del cromosoma Y en pruebas de paternidad es que sólo sirve en aproximadamente el 50% de los casos, es decir, cuando el hijo en disputa es varón.
Interpretación de haplotipos del cromosoma Y en identidad humana
A diferencia de las pruebas de ADN normales donde se considera la frecuencia de cada uno de los alelos que concuerdan entre SP y H, para el cromosoma Y que se hereda en bloque, se debe considerar la frecuencia de toda la combinación de alelos, es decir, el haplotipo completo. En este sentido, los estudios en México son más escasos que los STRs no-sexuales, aunque recientemente hemos publicado la base de datos de Y-STRs que casi triplicará las poblaciones hasta ahora estudiadas (Salazar-Flores y cols. 2009). La forma más sencilla de comparar la frecuencia de un haplotipo de Y-STRs en un caso de identidad humana es vía internet, ya que los datos antes mencionados se han ingresado a una base de datos internacional (www.yhrd.org). En esta página se puede ingresar un haplotipo de Y-STRs para que se busque cuantas veces se ha observado en alguna población seleccionada o en toda la base de datos, y con esta información se procede a estimar el índice de paternidad (o en su caso de hermandad vía paterna) así como la probabilidad respectiva.
Ejercicios de Control de Calidad
El más reconocido por su trayectoria desde 1992 e impacto en el ámbito científico de poblaciones hispanoamericanas es el GEP-ISFG (www.gep-isfg.org) o Grupo Español-Portugués de la Sociedad Internacional de Genética Forense (International Society of Forensic Genetics), que organiza ejercicios de colaboración con el objetivo de avanzar en la estandarización de los métodos empleados por distintos laboratorios para el análisis de marcadores genéticos para identificación humana. El ejercicio de control es coordinado por la Unidad de Garantía de Calidad del Departamento de Madrid del Instituto Nacional de Toxicología.
En este ejercicio pueden participar todos los laboratorios interesados del grupo. A cada laboratorio se le asigna un código para garantizar el anonimato de los resultados. A los laboratorios participantes se les remiten seis manchas (preferentemente de sangre, pudiendo incluir otro fluido biológico) sobre distintos soportes, se les solicita la obtención de perfiles de ADN con los marcadores habitualmente utilizados en su laboratorio. En el ejercicio se incluye una investigación de paternidad, solicitando a los laboratorios una valoración estadística de resultados y una interpretación final. Los resultados se recogen sobre un formulario vía internet que incluye detalles sobre metodología y resultados obtenidos los cuales deben ser enviados por el laboratorio en un periodo de tiempo de tres meses desde la recepción de las muestras. Se ofrece la posibilidad al laboratorio de enviar resultados para cada marcador al control de calidad o simplemente como intercambio de resultados para aquellos nuevos marcadores, en los que se está montando y validando la técnica. El centro coordinador elabora un informe con el resumen de la información remitida por los laboratorios, incluyendo metodologías y resultados. El centro coordinador emite certificados para los laboratorios participantes, incluyendo los marcadores en los que ha participado y obtenido un resultado acorde con el consensuado y en los que hay al menos tres laboratorios que han emitido resultados.
Otra de las instancias que organiza ejercicios de control de calidad es el SLAGF o Sociedad Latinoamericana de Genética Forense (www.slagf.org). La mecánica es similar, se reciben muestras en papel, se procesan para obtener el perfil genético con los sistemas genéticos del laboratorio, se reportan los perfiles en un formulario y además de resuelve un caso teórico de paternidad. Si se ha resuelto adecuadamente el ejercicio se emite una constancia.
Conclusiones
En los últimos años el desarrollo de las técnicas de biología molecular ha facilitado enormemente la tarea de identificación genética, gracias a sistemas genéticos estandarizados (STRs) que pueden compararse entre laboratorios. A pesar del desarrollo de nuevas tecnologías para analizar marcadores genéticos de un nucleótido (SNPs[35]), suena difícil que desplacen a los STRs de las cuales se han generado ya bases de datos gigantescas en diferentes países, principalmente como auxiliares en la investigación criminal, por ejemplo comparando el perfil de ADN de una escena de un crimen con una base de datos que facilita la labor de buscar sospechosos.
Sin embargo, cabe señalar la importancia de la capacitación de personal de laboratorios y los involucrados en la impartición de justicia, ya que desde mi punto de vista este es uno de los retos más importantes en México para lograr la correcta interpretación de la prueba de ADN con bases científicas, estableciendo perfectamente la responsabilidad tanto de los peritos en genética forense como de los jueces. Por ejemplo, en un caso criminal la función del perito no es señalar si los sospechosos son o no culpables, sino establecer si, por ejemplo, el perfil de ADN de una mancha de sangre encontrada en la escena del crimen corresponde a la del sospechoso, lo que indica que éste estuvo allí más no que él sea un criminal. En cambio, al juez le tocará decir la culpabilidad o inocencia del sospechoso, considerando no solo la evidencia genética, sino también la información no genética de relevancia, por ejemplo si conocía o había amenazado a la víctima, si tiene antecedentes de violencia, si lo vieron en la zona antes del crimen, etc. En paternidad, aunque el resultado de la prueba sí se relaciona directamente con la resolución que dará finalmente el juez, debe considerarse la posibilidad de situaciones especiales como que el supuesto padre haya recibido un transplante (lo que cambiaría su perfil de ADN), o que el padre biológico estuviera relacionado con él supuesto padre, lo que incrementaría la posibilidad de coincidencia. Finalmente, esto nos llevar a concluir que las pruebas de ADN actualmente son técnicamente confiables y relativamente fáciles de realizar, nuestro mayor reto ahora es que el público y el personal de laboratorio y de justicia la entienda correctamente, para lo cual se realzó este trabajo.
Literaturas Recomendadas
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Estudios Poblacionales para la interpretación de la Prueba de ADN en México
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[1] El Dr. Héctor Rangel es Biólogo, Maestro y Doctor en Genética Humana egresado de la Universidad de Gudalajara (UdeG); además de ser asesor científico de DNA Profile SC, es profesor-investigador titular del CUCienega-UdeG, donde dirige el Instituto de Investigación en Genética Molecular en Ocotlán, Jalisco. Es miembro del Sistema Nacional de Investigadores (SNI-CONACyT), del Grupo Español-Portuges de la International Society of Forensic Genetics (GEP-ISFG), y de la misma ISFG, de la Sociedad Latinoamericana de Genética Forense (SLAGF), y de la Asociación Mexicana de Genética Humana (AMGH) .
Es autor de varios capítulos en libros y artículos de divulgación científica relacionados con la prueba de ADN y la aplicación de marcadores moleculares para estudios en la población mexicana, los cuales están publicados en artículos científicos. Ha dirigido y/o asesorado varias tesis de licenciatura, maestría y doctorado en el área de Ciencias de la Salud, y ha participado como ponente o conferencista en docenas de eventos científicos relacionados con la genética desde 1997. Ha recibido varias distinciones, entre las que destacan: mención honorífica en tesis de maestría (1998), presea al mérito académico en el área de Ciencia e Investigación por el STAUdeG (2002), dos veces 1er lugar y una vez segundo del premio “HECTOR MARQUEZ MONTER” al mejor trabajo de investigación por la Asociación Mexicana de Genética Humana (1999, 2004 y 2008), nombrado “Biólogo Destacado” por los Biólogos Colegiados de Jalisco (2005). Fue asesor del trabajo que obtuvo el “Premio Chihuahua 2006” en Ciencias Biológicas, y ganador de un Premio Nacional del INAH (2007) por su trabajo de divulgación inédito en Antropología Molecular.
[2] ADN: ácido desoxirribonucleico, también conocido como DNA por sus siglas en inglés.
[3] Gemelos monocigotos: Aquellos hermanos que provienen del mismo cigoto.
[4] Nucleótido: Unidad fundamental del ADN, formado por la azúcar ribosa, un fosfato y una base nitrogenada: Adenina (A), Guanina (G) Citosina (C) o Timina (T).
[5] Proteína: Cadena de aminoácidos unidos por enlaces péptidicos, por lo que se denominan también polipéptidos, que desarrollan la mayoría de funciones celulares.
[6] Genoma: Dotación genética completa que caracteriza a un individuo o una especie
[7] Gen: Fragmento de ADN con información para codificar una proteína.
[8] Alelo: Forma alterna de una secuencia o fragmento de ADN
[9] Marcador genético-molecular: Secuencia de ADN variable que presenta más de un alelo en la población, y que permite diferenciar el genoma materno del paterno en un individuo, como diferenciar individuos entre sí
[10] Genotipo: Combinación de alelos de un individuo para un gen o secuencia de ADN especifica
[11] Marcador STR: Del inglés, short tandem repeats, cuya variabilidad se basa en el número de veces que se repite una secuencia corta (p. ejem. GATA); los alelos suelen definirse por el número de repeticiones
[12] heterocigoto: Individuo que presenta un genotipo con un par de alelos diferentes para cierta secuencia de ADN (gen o marcador genético)
[13] homocigoto: Individuo que presenta un solo alelo en cierta secuencia de ADN (gen o marcador genético). Presumiblemente ambos padres le heredaron el mismo alelo
[14] Perfil de ADN: Conjunto de genotipos de un individuo para varios STRs
[15] PCR: siglas en inglés de “Reacción en cadena de la polimerasa”, técnica para replicar in vitro alguna secuencia de interés en el ADN, que genera millones de copias (amplifica) de ésta
[16] Primers: Pequeñas secuencias de nucleótidos usadas en la PCR para delimitar la región que se quiere amplificar; su extremo 3’ es usado por la Taq polimerasa para añadir nucleótidos
[17] Taq polimerasa: Enzima termoestable capaz de añadir nucleótidos al extremo de un primer para sintetizar una nueva cadena; fue extraída de la bacteria Thermus aquaticus, de donde deriva su nombre.
[18] Electroforesis: Separación de una molécula en un medio de soporte por acción de un campo eléctrico, en base a su carga, peso molecular y forma.
[19] Escalera alélica: Fragmentos de ADN que contienen todos o la mayoría de alelos de uno o varios STRs de un sistema genético, los cuales sirven de referencia para definir por comparación el alelo del individuo.
[20] Electroforesis Capilar (EC): Método de electroforesis a través de un tubo del tamaño de un capilar relleno de polímero. Permite aplicar mayores voltajes, separar más rápido la molécula, y detectar la fluorescencia de ADN marcado con un fluoróforo de forma automática.
[21] Kit o sistema genético: Conjunto de marcadores genéticos (STRs) que pueden ser analizados simultáneamente, por ejemplo por PCR multiplex y electroforesis capilar
[22] Amelogenina: Marcador que define en el perfil genético si el individuo es hombre (XY) o mujer (XX)
[23] Fluorocromo: Molécula capaz de emitir fluorescencia después de un período de excitación
[24] Electroferograma: Gráfica cuyos picos que representan fragmentos de ADN amplificados (STRs) marcados con fluorocromos y como fueron migrando a través del capilar, determinando así su tamaño (pb) y la fluorescencia que emiten (color).
[25] Exclusión de Paternidad: Cuando no concuerda ningún alelo entre supuesto padre e hijo; o cuando el alelo que le heredo el padre biológico al hijo en disputa no se encuentra presente en el supuesto padre. Lo anterior para uno o más marcadores genéticos, aunque en un caso real se requiere que dos marcadores excluyan la paternidad.
[26] FBI, siglas de Federal Boreau Investigation
[27] CODIS, siglas de Combined DNA Index System, que es un conjunto de STRs sugerido para identificación humana, con el fin de crear bases de datos de perfiles genéticos que permitan intercambiar información de interés para la impartición de justicia, etc. (crímenes violentos, crímenes contra la libertad sexual, identificación de militares, entre otros.)
[28] Exclusión de segundo orden, aquella exclusión donde SP y H son homocigotos para alelos diferentes, lo que abre la posibilidad de que en realidad compartan un alelo “invisible”, denominado alelo nulo.
[29] Mutación, Cambio en el material genético, en paternidad estas mutaciones se dan en los gametos (espermatozoides u óvulos) que darán origen a una falsa exclusión entre el padre biológico y el hijo.
[30] AABB, American Association of Blood Banks.
[31] Poder de Exclusión, probabilidad que ofrece un marcador para excluir a un SP falsamente implicado en una prueba de paternidad (es decir, se sabe que el no es el padre)
[32] Cromosoma, forma compactada del material genético que se forma cuando la célula se va a dividir, ya sea para formar más células del cuerpo (mitosis) o células reproductivas (espermatozoides u óvulos).
[33] Meiosis, división celular mediante la cual se forman células reproductivas con la mitad de la carga genética normal (doble o diploide)
[34] Haplotipo, combinación de material genético que se hereda de padres a hijos en bloque o en conjunto, para el cromosoma Y refiere a los alelos obtenidos con varios marcadores STRs
[35] SNPs, polimorfismos de un nucleótido (i.e. A®G), del inglés Single nucleotide polymorphisms.
Así como por factores de desajustes hormonales, glandulares, neuronales o nerviosos y circulatorios, aunados a otros del entorno y altibajos de bilirrubina, el tipo de sangre y su factor rh puede cambiar de tal manera, que una persona de tipo 0+ puede volverse 0- y cambiarse a A o a otro el tipo de sangre, igual pasa con el ADN de padres a hijos, aproximadamente en promedio de varios millones según la población de la que se trate, un hijo puede no denotar procedencia de su progenitor legítimo por varios factores a considerar:
- Por ser más fuerte la herencia genética de uno de los padres.
- Por los factores internos, externos y emotivos que inciden sobre el bebé desde la fecundación y encarnación del óvulo.
- Por rechazo psicofísico del hijo-a a uno de sus progenitores.
- Por problemas neuronales, glandulares, hormonales, circulatorios, excretores o una combinación de todos.
- Por el libre albedrío en la formación de su ser y por ende en la conformación de su carga genética.
Además de las pruebas de ADN, cuando no concuerden con alguno de los progenitores, deben analizar los rasgos fisionómicos, los gestos, la conformación de su contextura ósea y contextura de su piel y de algunos órganos del cuerpo que son parecidos casi en su totalidad a los de sus progenitores, además de la sintomatología de enfermedades preexistentes y manías propias del linaje familiar.
A MIS GORDITOS Y FLAQUITOSQuiéranse como son, procurando mejorar su interior y su exterior sin hacerse daño. Si sienten trauma por su apariencia, acudan a un profesional psiquiatra que les ayude a amarse y aceptarse como son mis gorditos y flaquitos. A los gorditos: vístanse con ropas cómodas que no les apreten, que caigan suavemente a lo largo de su cuerpo sin apretarse demasiado, de esa manera, están más cómodos y podrán hacerse a modelos que les sienten bien y los haga ver más hermosos o tan hermosos como son.
A los flaquitos, coman bien y usen ropa con vuelos, prenses, hombreras y rellenitos suaves, que les haga sentirse más cómodos consigo mismos y se vean tan hermosos como son. Sin importar si son gordos o flacos, lo más importante es que se amen como son, se consientan y se cuiden con esmero, sin caprichos y dentro de sus posibilidades.
Vivan bien con lo que tienen y no se amarguen por lo que no tienen. Desde adentro, procuren siempre mejorar su yo, que lo de afuera, se ve mejor, cuando el interior es hermoso, alegre y tiene bienestar espiritual e integral.
Los flaquitos tomen Vino Sansón y batido de kola granulada, con vino blanco, cristales de penca de sábila, aceite de hígado de bacalao y emulsión de Scott, todo esto licuado y bajo supervisión y la dosis que indique el médico.
Los gorditos deben comer a las horas que les indiqué las comidas, 8 vasos de agua en el día entre comidas, 4 bananos en la mañana en ayunas durante 15 días, descansan 15 días y vuelven a repetir 3 veces, cada año. Coman 1 diente de ajo en ayunas y lo pasan con jugo de ½ limón, durante un mes, sino tienen úlcera, gastritis o reflujo. Coman bien, regulen grasas y azúcares y combinen bien sus comidas, cítricos con cítricos, dulces con simples, ácidos con simples o poco dulces, etc.
CUIDADO CON EL AZÚCAR: es importante que sepan que el azúcar especial para diabéticos, no es tan inocuo, algunos pueden ser más nocivos que el azúcar refinado. Lo más importante es que se amen, no piensen que todo les hace daño, no tengan miedo a las comidas, dosifíquenlas y coman con mesura, para que vivan sanos, alegres y con bienestar integral. (Busquen en Google los temas para ver las imágenes). Gracias benditos. MARTHA LUCIA.
